猴頭菇又稱猴頭菌、猴頭蘑,是齒菌科植物猴頭的子實(shí)體。猴頭菇菌肉鮮嫩,鮮美可口,是一種很名貴的食用菌,被稱為八大山珍之一,具有很高的營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。猴頭菇富含蛋白質(zhì)、不飽和脂肪酸、多糖類、人體必需的各種氨基酸、礦物質(zhì)及維生素等多種營養(yǎng)物質(zhì)。
目前猴頭菇多糖提取方面的研究多為利用超聲波、微波、熱水提等方法來提取,采用酶法降解提取多糖的資料比較少,酶法水解以水為溶劑,酶解溫度等酶解條件比較溫和,營養(yǎng)物質(zhì)的損失少。關(guān)于猴頭菇多糖的生物學(xué)作用方面,經(jīng)國內(nèi)外一些學(xué)者的研究實(shí)驗(yàn)證明猴頭菇多糖具有抗氧化、抗疲勞、保護(hù)胃腸道黏膜、提高免疫力等功效。查閱資料關(guān)于猴頭菇多糖精深產(chǎn)品加工領(lǐng)域的研究比較少,本文利用酶法提取猴頭菇多糖,以多糖提取液為原料研制一種猴頭菇多糖飲料,為猴頭菇多糖精深加工產(chǎn)品的開發(fā)和市場開拓提供理論思路。
一、材料與方法
1、材料與試劑
猴頭菇:市售;葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品:南京森貝伽生物科技有限公司;纖維素酶(酶活力規(guī)格:10000u/g):南寧東恒華道生物科技有限責(zé)任公司;檸檬酸、白砂糖:市售食品級(jí)。
2、主要儀器與設(shè)備
DHG-9240A恒溫干燥箱:上海越眾儀器設(shè)備有限公司;JJ-2組織搗碎機(jī):無錫萊浦儀器設(shè)備有限公司;HH-M6恒溫水浴箱:金壇市城西春蘭實(shí)驗(yàn)儀器廠;FA1204B電子分析天平:上海精密科學(xué)儀器有限公司;UV-1700紫外可見分光光度計(jì):日本島津;PHS-3C型PH計(jì):上海精密科學(xué)儀器有限公司。
3、試驗(yàn)方法
(1)猴頭菇多糖提取方法
取一定量的猴頭菇,去除雜質(zhì),在恒溫干燥箱干燥后用組織搗碎機(jī)破碎成粉末,加入一定量的蒸餾水,放入恒溫水浴箱,待溫度上升到50℃時(shí),加入纖維素酶進(jìn)行酶解,酶解結(jié)束后加熱到90℃滅酶5min,過濾離心,離心液即為猴頭菇多糖提取液。
(2)猴頭菇多糖飲料制備工藝
猴頭菇多糖提取液+凈化水→搖勻→調(diào)配→過濾→灌裝殺菌→冷卻→成品
調(diào)配:在猴頭菇多糖提取液中加入白砂糖、檸檬酸等進(jìn)行調(diào)配。
灌裝:將多糖飲料裝入滅菌的玻璃瓶中,封口。
殺菌:將灌裝好的多糖飲料采用巴氏滅菌法滅菌,加熱到80℃殺菌30min,殺菌后用冷水噴淋使其快速冷卻下來。
(3)猴頭菇多糖提取單因素試驗(yàn)
以猴頭菇多糖提取率為試驗(yàn)指標(biāo),分析料液比、酶添加量、酶解溫度和酶解時(shí)間四個(gè)因素對(duì)猴頭菇多糖提取率的影響。
(4)猴頭菇多糖提取Box-Behnken中心組合試驗(yàn)
在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上,確定BoxBehnken中心組合試驗(yàn)的因素和水平,以料液比、酶添加量、酶解溫度和酶解時(shí)間為自變量,以猴頭菇多糖提取率為響應(yīng)值,運(yùn)用DesignExpert8.0.5軟件對(duì)試驗(yàn)進(jìn)行設(shè)計(jì),對(duì)猴頭菇多糖提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。Box-Behnken中心組合試驗(yàn)各因素及水平見表1。
(5)多糖含量及多糖得率測定
以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品作為對(duì)照,采用苯酚硫酸法測定。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為
y=6.3536x+0.0049,R2=0.9997。
多糖得率(%)=cV/m×100
式中c為猴頭菇多糖溶液濃度(mg/mL),V為多糖液體積(mL);m為猴頭菇粉末質(zhì)量(mg)
(6)猴頭菇多糖飲料正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)
以產(chǎn)品的感官評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)為試驗(yàn)指標(biāo),考察猴頭菇多糖提取液添加量、白砂糖添加量、檸檬酸添加量這三個(gè)指標(biāo)對(duì)猴頭菇多糖飲料品質(zhì)的影響。采用L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)(表2),對(duì)猴頭菇多糖飲料配方工藝進(jìn)行優(yōu)化,得到猴頭菇多糖飲料的最佳配方。
二、結(jié)果與分析
1、單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析
由圖1可知隨著料液比的增大,多糖得率整體呈增大趨勢,料液比在達(dá)到20mg/mL之后,多糖得率逐漸趨于平緩。
由圖2可知隨著酶添加量的增大,多糖得率不斷增大,當(dāng)酶添加量達(dá)到2%,可能由于酶解得到的猴頭菇多糖在酶的作用下發(fā)生部分降解使得多糖得率增加趨勢平緩稍有下降。
由圖3可知,酶解溫度在60℃之前隨著酶解溫度的升高多糖得率在增大,當(dāng)酶解溫度超過60℃時(shí),一方面由于溫度高使得酶活性降低,另外有可能酶解得到的多糖分子發(fā)生降解,使得多糖得率呈下降趨勢。
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