（3）模型方程的建立與顯著性檢驗

根據(jù)多元回歸分析擬合試驗結(jié)果(表4和表5)可得到：

苦養(yǎng)蛋白得率(Y1)的二次回歸方程：

Y₁=7.85+0.48A+0.35B+0.28C—0.27AB+0.058AC+0.34BC—1.15A₂一1.81B₂一1.67C₂；

苦養(yǎng)黃酮得率(Y₂)的二次回歸方程：

Y₂=1.13+0.073A+0.068B+0.15C+0.19AB—0.010AC—0.12BC—0.28A²一0.16B²—0.13C²，

并進行方差分析。

由方差分析可知，回歸模型極顯著(p＜0.0001)，提取苦蕎蛋白方程失擬項為0.5607＞0.05；提取黃酮的失擬項為0.0894＞0.05，二者都表明失擬項不顯著，且苦養(yǎng)蛋白的R²=0.9845，R²_Adi=0.9646； 黃酮的R²=0.9829，R²_Adi=0.9610，表明該模型與實際值擬合性很好，可以利用二者的回歸方程確定苦蕎蛋白和黃酮類物質(zhì)的最佳提取工藝條件。根據(jù)回歸模型的方差分析也表明對苦養(yǎng)蛋白影響極顯著的因素有A(粒度)、A₂、B₂、C₂，影響顯著的因素有B(pH)、C(溫度)，AB、AC、BC的交互影響均不顯著。對苦養(yǎng)黃酮類化合物影響極顯著的是C(溫度)、A²、B²，影響顯著的有AB、AC的交互作用，A(粒度)、B(pH)、BC、C²影響不顯著。從單因素水平分析可以得出，各個因素對苦蕎蛋白影響的主次順序為粒度＞pH＞溫度，對苦養(yǎng)黃酮影響的主次順序為溫度＞粒度＞pH。

（4）響應(yīng)面分析

依照Box—Behnken中心組合設(shè)計原理和試驗數(shù)據(jù)得出的各因素間的交互作用如圖6和圖7，根據(jù)圖6和圖7的響應(yīng)面圖及等高線圖能夠比較直觀地反應(yīng)各個因素之間的交互作用及其對響應(yīng)值的影響。從各因素之間交互的圖形可以看出各因素間交互作用的強弱，其中曲線走勢越陡說明其影響越顯著；曲線走勢越平滑說明其影響越小。提取苦蕎黃酮和蛋白的響應(yīng)面都存在極值，即響應(yīng)面有最高點峰值。通過分析可知，當(dāng)粉碎粒度為63.60目，pH為9.15，提取溫度為67.26℃，液料比為30∶1mL/g，超聲時間為40min時為超聲同步提取苦蕎蛋白和黃酮類化合物的最佳提取工藝條件。回歸模型預(yù)測理論中蛋白得率為7.90％，黃酮得率為1.17％。對結(jié)果進行驗證性實驗，考慮到實際操作的可行性，將苦蕎蛋白和黃酮類化合物的最佳同步提取工藝條件修正為：液料比為30∶1mL/g，超聲時間為40min，粉碎粒度為60目，pH為9.15，提取溫度為67.2℃，在此條工藝條件下進行超聲輔助苦蕎蛋白和黃酮的同步提取。

（5）驗證試驗

在粉碎粒度為60目，pH為9.15，超聲時間為40min，提取溫度為67.2℃，液料比為30∶1mL/g工藝條件下重復(fù)提取三次，得到苦蕎蛋白得率為7.79％，苦蕎黃酮得率為1.14％。驗證試驗結(jié)果與模型的預(yù)測值相吻合，表明模型可靠，適用于苦蕎蛋白和黃酮類物質(zhì)的同步提取。

三、結(jié)論

本試驗通過響應(yīng)面法確定超聲輔助苦蕎中蕎麥蛋白和黃酮類化合物的最佳同步提取條件為：

液料比為30∶1mL/g，超聲時間為40min，粉碎粒度為60目，pH為9.15，提取溫度為67.2℃。

在此工藝條件下苦蕎蛋白得率為7.79％，苦蕎黃酮得率為1.14％。為蛋白和黃酮類化合物的同步提取研究提供了一定的理論依據(jù)，為苦蕎麥產(chǎn)品的研發(fā)提供新的途徑和技術(shù)支撐。

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