2.2.7 樣品含量測定

按“1.2.5”項(xiàng)下采用QAMS和內(nèi)標(biāo)法計算羊肚菌中17種氨基酸的含量，結(jié)果見表4。由表4可知，QAMS和內(nèi)標(biāo)法測定結(jié)果基本一致。對2種方法測得結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)分析，結(jié)果顯示，2種方法測定的17種有效成分的含量均無顯著差異（P＞0.05）。說明一測多評法在測定羊肚菌氨基酸中的適用性和可行性得到了驗(yàn)證，在對照品缺乏的情況下，所建立的一測多評法可以作為一種經(jīng)濟(jì)、準(zhǔn)確、快捷的方法應(yīng)用羊肚菌質(zhì)量的評價。

2.2.8 耐用性考察

2.2.8.1 不同色譜柱的考察

采用依利特HypersilODS2（250mm×4.6mm，5μm）、AgilentC₁₈（250mm×4.6mm，5μm）色譜柱在Agilent1100HPLC測定16種氨基酸的相對校正因子影響見表5。由表5可知，16種氨基酸的相對校正因子在不同色譜柱下的RSD均小于1.85%，說明相對校正因子在不同品牌色譜柱下具有良好的重復(fù)性。

2.2.8.2 不同儀器的考察

采用依利特HypersilODS2（250mm×4.6mm，5μm）色譜柱，考察Agilent1100HPLC、Agilent1260HPLC對16種氨基酸相對校正因子的影響見表5。由表5可知，不同儀器下的氨基酸相對校正因子的RSD均不大于1.57%，重復(fù)性良好，說明此方法適用于不同的色譜體系。

2.2.8.3 色譜峰定位

色譜峰的準(zhǔn)確定位是保證QAMS法應(yīng)用的前提。以谷氨酸為內(nèi)參物，采用不同色譜柱及高效液相色譜儀，驗(yàn)證相對保留時間定位色譜峰的準(zhǔn)確性，詳見表6。由表6可知，在不同色譜柱和色譜系統(tǒng)下，相對保留時間變化幅度較小，RSD均不大于1.14%，可準(zhǔn)確定位。

2.3 不同地區(qū)羊肚菌的測定

采用一測多評法測定6個地區(qū)羊肚菌中17種氨基酸的含量見表7。由表7可知，羊肚菌富含8種必需氨基酸，其占氨基酸總量的47.22%～55.34%，其中Thr含量是最高的，占總量的16.55%～21.77%。甜味氨基酸占總量的36.60%～45.77%，鮮味氨基酸占總量的21.63%～27.34%。Leu和Val具有焙烤風(fēng)味和特殊甜味，這些氨基酸在羊肚菌香味的形成過程中有重要作用，這是羊肚菌具有獨(dú)特風(fēng)味的重要原因。

藥用氨基酸種類齊全，占氨基酸總量的47.74%～56.42%，其中Glu、Lys平均占藥用氨基酸總量的17.29%、17.05%。羊肚菌中含有的豐富賴氨酸可以補(bǔ)充谷物中賴氨酸的不足，Glu對腦神經(jīng)損傷、癲癇有效，還具有護(hù)肝功效。綜上所述，羊肚菌富含各類藥用氨基酸為其開發(fā)各種保健食品、藥品以及日常食用的藥膳提供了一定的基礎(chǔ)。

不同產(chǎn)地羊肚菌之間氨基酸總量有明顯差異，長坡嶺森林公園下野生的羊肚菌樣品氨基酸總量最高，新疆羊肚菌氨基酸總量最少，且不同地區(qū)的各氨基酸含量有一定差異，由此可知其品質(zhì)差異與其環(huán)境、氣候以及種植方式等因素有關(guān)。

對六個不同地區(qū)的羊肚菌氨基酸測定結(jié)果顯示，羊肚菌中氨基酸含量豐富，且富含人體所需的必需氨基酸和藥用氨基酸，有較高的食用價值，可作為人體必需氨基酸營養(yǎng)的天然來源之一，且極具開發(fā)作為補(bǔ)充氨基酸的功能性食品；其鮮味、甜味氨基酸含量較高，是開發(fā)食品調(diào)味劑的天然寶庫。綜上所述，羊肚菌在食品、醫(yī)療領(lǐng)域具有很大的開發(fā)潛力和廣闊的應(yīng)用前景。

3 結(jié)論

采用QAMS法測定羊肚菌中17種氨基酸的含量，建立并應(yīng)用內(nèi)標(biāo)法驗(yàn)證該方法同時測定羊肚菌中17種氨基酸含量的可行性，結(jié)果表明，兩種方法測得的結(jié)果無顯著性差異（P＞0.05），不同色譜柱和儀器之間的相對校正因子重復(fù)性良好，且QAMS法操作簡單，極大程度提高了工作效率，可為建立羊肚菌的質(zhì)量評價提供參考。同時，為羊肚菌的應(yīng)用提供一定的理論支持，為羊肚菌的開發(fā)利用指明了方向，對推動羊肚菌行業(yè)的發(fā)展有重要意義。

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