奶茶由于兼?zhèn)洳璧那逑愫腿榈乃譂?，以及繁多的配料，加上各式的營(yíng)銷手段，已然成為“網(wǎng)紅飲品”，尤其受年輕人青睞。根據(jù)前瞻產(chǎn)業(yè)研究院發(fā)布的《中國(guó)奶茶行業(yè)市場(chǎng)需求與投資規(guī)劃分析報(bào)告》統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，截至2018年第三季度末，全國(guó)現(xiàn)制茶飲門店數(shù)量達(dá)到41萬之多，同比增長(zhǎng)了78.26%，預(yù)計(jì)全國(guó)奶茶市場(chǎng)容量可接近千億元。但是，現(xiàn)制奶茶并不是一種預(yù)包裝食品，可能會(huì)導(dǎo)致其檢測(cè)及市場(chǎng)的監(jiān)管力度不夠。目前對(duì)于其基礎(chǔ)成分例如糖分、脂肪、反式脂肪酸、咖啡因的檢測(cè)研究較多，而奶茶和果茶飲品制作過程中往往采用勾兌的方式進(jìn)行調(diào)配，可能使用食品添加劑，若長(zhǎng)期頻繁超量食用含有添加劑的食品，將對(duì)人體健康造成損害，已有關(guān)于奶茶使用食品添加劑超標(biāo)的報(bào)道。并且消費(fèi)者對(duì)食品添加劑的關(guān)注度越來越高，現(xiàn)制奶茶和果茶作為“網(wǎng)紅飲品”，消費(fèi)量如此高，人們有權(quán)了解其食品添加劑使用情況。因此，檢測(cè)現(xiàn)制奶茶和果茶飲品中的常見添加劑對(duì)保護(hù)消費(fèi)者的健康和消費(fèi)權(quán)益具有重要意義。食品添加劑種類繁多，基于奶茶和果茶的性狀，建立了常見的防腐劑、甜味劑和色素同時(shí)測(cè)定的方法，并用于現(xiàn)制奶茶和果茶的檢測(cè)。

食品添加劑的測(cè)定方法主要有高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、液相色譜－質(zhì)譜法、氣相色譜法、電化學(xué)分析法等，其中高效液相色譜法最常用，儀器普及。目前報(bào)道的高效液相色譜檢測(cè)方法大多針對(duì)同一種類的幾種食品添加劑，分析品種少，且極少用于現(xiàn)制奶茶和果茶飲品。鑒于此，本研究擬采用高效液相色譜二極管陣列檢測(cè)技術(shù)，建立同時(shí)測(cè)定奶茶和果茶飲品中10種常見添加劑的方法，包括苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、、糖精鈉、安賽蜜、檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃、赤蘚紅，并對(duì)成都市內(nèi)網(wǎng)紅熱門奶茶店現(xiàn)制現(xiàn)售的奶茶和果茶進(jìn)行檢測(cè)，為監(jiān)管部門監(jiān)管提供技術(shù)支持，同時(shí)為大眾提供相關(guān)建議。

1材料與方法

1.1儀器與試劑Ultimate3000高效液相色譜儀(美國(guó)賽默飛世爾科技公司)。山梨酸標(biāo)準(zhǔn)品(99.4%，C16971500)，購(gòu)自Dr.Ehrenstorfer公司;準(zhǔn)確稱取山梨酸標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇定容至刻度，配制成濃度為1.00mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品(99.9%，B00003452)，購(gòu)自北京曼哈格公司;準(zhǔn)確稱取脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)品，加8g/L的氫氧化鈉溶液溶解，用水稀釋定容，配制成濃度為1.00mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，購(gòu)自北京曼哈格公司:安賽蜜(1.00mg/mL，B0002740);糖精鈉(1.00mg/mL，GBW(E)100008);苯甲酸(1.00mg/mL，GBW(E)100006)、檸檬黃(0.50mg/mL，GBW(E)100001);日落黃(0.50mg/mL，GBW(E)100003);莧菜紅(0.50mg/mL，GBW(E)100002a);胭脂紅(0.50mg/mL，GBW(E)100004a);赤蘚紅(0.50mg/mL，GBW(E)100191)。甲醇和乙腈(色譜純)，乙酸銨、乙酸鋅、亞鐵氰化鉀、氨水、磷酸二氫鈉均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水均為超純水(Mili－Q純水系統(tǒng))。奶茶和果茶樣品隨機(jī)購(gòu)自成都市各奶茶飲品店。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1色譜條件色譜柱:Venusil MPC18柱(250mm×4.6mm，5μm);流動(dòng)相A:0.02mol/L乙酸銨，流動(dòng)相B:甲醇，梯度洗脫程序如表1所示。流速1ml/min;二極管陣列檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)為530nm、427nm、230nm;柱溫:30℃;進(jìn)樣量20μL。

1.2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制吸取適量各添加劑的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用超純水稀釋并配制成濃度為0mg/L、0.20mg/L、0.50mg/L、1.00mg/L、2.00mg/L、5.00mg/L、8.00mg/L、10.0mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，進(jìn)樣高效液相色譜儀分析，以各添加劑濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.3樣品前處理奶茶樣品:稱取適量樣品于容量瓶中，加甲醇至終濃度為50%并定容，渦旋振蕩2min，10000rpm離心5min，經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾后供HPLC分析。果茶樣品:取適量樣品，加氨水調(diào)節(jié)pH至中性，其余步驟同奶茶樣品。

2結(jié)果與討論

2.1色譜條件的優(yōu)化

2.1.1檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇實(shí)驗(yàn)采用二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，在波長(zhǎng)190～600nm范圍內(nèi)對(duì)10種組分進(jìn)行波長(zhǎng)掃描，得到各組分的最大吸收波長(zhǎng)，為確保各組分有足夠的靈敏度以及盡量減少基質(zhì)干擾，實(shí)驗(yàn)選擇了230nm、427nm和530nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。230nm作為苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸、安賽蜜、糖精鈉的檢測(cè)波長(zhǎng)，檸檬黃、日落黃、莧菜紅和胭脂紅的檢測(cè)波長(zhǎng)為427nm，530nm波長(zhǎng)下測(cè)定赤蘚紅。標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖見圖1。

2.1.2流動(dòng)相的選擇乙酸銨和磷酸鹽體系常用作著色劑、防腐劑、甜味劑的分離流動(dòng)相。分別嘗試以甲醇－乙酸銨溶液、乙腈－乙酸銨溶液、甲醇－磷酸二氫鈉溶液、乙腈－磷酸二氫鈉溶液作為流動(dòng)相。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，以乙腈作為流動(dòng)相時(shí)，部分峰總有重疊;磷酸鹽體系做流動(dòng)相時(shí)，基線噪聲較大。實(shí)驗(yàn)選擇采用甲醇－乙酸銨溶液作為流動(dòng)相，并進(jìn)一步優(yōu)化流動(dòng)相比例。首先進(jìn)行等度洗脫，當(dāng)乙酸銨溶液比例小于10%時(shí)，大部分添加劑均能被分離，但赤蘚紅出峰至少需要1h。為了讓各組分在適宜的時(shí)間內(nèi)得到有效分離，實(shí)驗(yàn)采用梯度洗脫。通過反復(fù)調(diào)整梯度洗脫程序，最終確定的程序見1.2.1，在此條件下運(yùn)行，10種添加劑和樣品雜質(zhì)在35min內(nèi)得到了有效分離。

2.1.3柱溫的選擇實(shí)驗(yàn)考察了柱溫為25℃～35℃時(shí)的分離情況。柱溫小于30℃時(shí)，各組分分離較好，但分離時(shí)間稍長(zhǎng)，峰型略展寬;柱溫在32℃以上時(shí)，有部分峰重疊。實(shí)驗(yàn)選擇柱溫為30℃，此時(shí)各組分的分離度良好且峰型尖銳。

聲明：本文所用圖片、文字來源《現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)》，版權(quán)歸原作者所有。如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)與本網(wǎng)聯(lián)系

相關(guān)鏈接：流動(dòng)相，磷酸鹽，樣品