將上述帶試樣殘渣的濾紙輕輕卷緊，移入另一個250mL容量瓶中，加入100mL彼得曼溶液，蓋上瓶塞，劇烈振蕩至濾紙碎成紙漿，將容量瓶置于60^oC±1^oC恒溫水浴中，保溫lh。

開始時每隔5min振蕩容量瓶1次，振蕩3次后再每隔15min振蕩1次，取出冷卻至室溫，用水稀釋至刻度，混勻。用干濾紙和干燥器皿過濾，棄去最初混濁濾液，所得濾液為浸出液Ⅱ[枸溶性磷(P₂O₅)浸出液〕。

有效磷的測定：有效磷的測定用移液管分別吸取10mL～20mL(P₂O₅小于20mg)浸出液I和浸出液Ⅱ一并放入400mL燒杯中，加入10mL HNO₃(1:1)溶液，用水稀釋至100mL，加熱至近沸，加入35 mL喹鉬檸酮試劑，蓋上表面皿，用文火加熱煮沸30s，取下，冷卻至室溫，用預(yù)先烘干至恒重的4號玻璃坩堝抽氣過濾，先將上層清液濾完，然后用傾瀉法洗滌沉淀1次～2次(每次約用25mL水)，最后將沉淀移人坩堝中，再用水繼續(xù)洗滌約3次～4次，將坩堝連同沉淀置于180℃士2^oC烘箱內(nèi)，待溫度達到180℃后烘干約45 min，移入干燥器中冷卻，稱重。直至生成沉淀，過濾、洗滌，最后取濾。

5、結(jié)果計算

式中: ω(P₂O₅)——過磷酸鈣中有效磷(P₂O₅)的質(zhì)量分數(shù)，%。

C_l——氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mol·L^-1。

C₂——鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mol·L^-1。

V₁——溶解沉淀時，加入氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積，mL。

V^,₁——空白試驗加入氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL。

V₂——滴定試液用去鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL。

V^，₂——滴定空白用去鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積，mL。

10^-3——將mL換算成L的系數(shù)。

m——試樣質(zhì)量,g。

ts——分取倍數(shù)，即浸出液總體積(Ⅰ+Ⅱ)與吸取浸出液的總體積比。

2.73——溶解沉淀時每摩爾氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液相當(dāng)于磷(P₂O₅)的質(zhì)量,g·mol^-1。

6、允許偏差

兩次平行測定結(jié)果的允許差＜0.20%。

五、釩鉬黃比色法

1、方法原理

用檸檬酸溶液[P(C₆H₈O₇·H₂O)=20g·L^-1〕一次浸提過磷酸鈣中的有效磷〔其中包括Ca (H₂P0₄)₂,CaHPO₄和游離H₃P0₄],浸出液中的正磷酸鹽與釩鉬酸銨在酸性條件下形成黃色的三元雜多酸(P₂O₅·V₂O₅·22MoO₃·nH₂O)。本法原理及其優(yōu)點：此法的優(yōu)點是顯色快，黃色很穩(wěn)定，在24h內(nèi)無顯著變化;要求顯色酸度范圍很寬，極限是0.04mol·L^-1～1. 6 mol·L^-1,最好是0.5mol·L^-1～ 1.0mol·L^-1，在HNO₃,HCI、HCIO₄、H₂SO₄等介質(zhì)中都可適用;干擾離子少，特別是Fe³⁺和Si的允許存在量遠高于鉬藍法;操作簡便快速，準(zhǔn)確度和重復(fù)性較高，相對誤差為1%～3% ；適測范困廣，約為1mg·L^-1～20mg·L^-1 P，吸收波長選擇:

比色時選用的波長(nm) 400 440 470 490

濃度范圍(mg·L^-1P) 0.25～5.5 2.0～15 4.0～17 7.0～20

2、儀器及設(shè)備

振蕩器；分光光度計。

3、試劑

（1）檸檬酸溶液[p(C₆H₈0₇·H₂O)=20g·L^-1］:稱取20g結(jié)晶檸檬酸(C₆H₈O₇·H₂O，分析純)，溶于水中，稀釋至1L。

（2）磷(P₂O₅)標(biāo)準(zhǔn)溶液[p(P₂O₅)=100mg·L^-1]:準(zhǔn)確稱取1.9176g磷酸二氫鉀(KH₂PO₄，分析純，105℃供干)于400mL燒杯中，用少量水溶解，移入1L容量瓶，加水至約400mL，加濃HNO₃5mL，用水定容，混勻，此為1000mg·L^-1 P₂O₅貯備液，可久貯。準(zhǔn)確吸取50mL貯備液于500 mL容量瓶中，用水定容，混勻，此為100mg·L^-1 P₂O₅標(biāo)準(zhǔn)溶液。

（3）釩鉬酸銨溶液: A液。25g鉬酸銨[(NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O，分析純]溶于400 mL水中；B液。1.25g偏釩酸銨(NH₄VO₃，分析純)溶于300mL沸水中，冷卻后加入250 mL濃硝酸(HNO₃，p≈1.42g·mL^-1，分析純)，再冷至室溫。將A液緩慢地傾入B液中，不斷攪勻，用水稀釋至1L，貯于棕色瓶中，此溶液酸的濃度為c(HNO₃)=4 mol·L^-1。

4、操作步驟

（1）有效磷的浸提 稱取混勻的過磷酸鈣樣品((1mm) 1.000g于250mL三角瓶中，加入100mL檸檬酸溶液，蓋緊塞子，在20^oC～25℃下振蕩30 min，用干燥濾紙和器皿過濾，棄去最初的濾液。

（2）有效磷的測定 吸取浸出濾液1.00 mL (含P₂O₅0.5mg～2mg)，放入50 mL容量瓶中，加水至約35mL，準(zhǔn)確加入10mL釩鑰酸按溶液(MO，用水定容，搖勻。放置20min后，在分光光度計上以470nm波長比色測定。同時做試劑空白試驗，以空白溶液調(diào)節(jié)吸收值為零點，測定試液吸收值。

（3）工作曲線繪制 分別吸取100mg·L^-1P₂O₅標(biāo)準(zhǔn)溶液0(空白), 2.5mL, 5mL, 7.5mL,10 mL,15mL.,20mL于50mL容量瓶中，各加與吸取樣液相同體積的空白溶液，加水至約35mL，同上2中步驟顯色和比色，測得各瓶溶液的吸收值。標(biāo)準(zhǔn)系列溶液P₂O₅的質(zhì)量濃度為0mg·L^-15mg·L^-1、10mg·L^-1、15mg·L^-1、20mg·L^-1、30mg·L^-1、40mg·L^-1，以吸收值為縱坐標(biāo)，磷(P₂0₅)濃度為縱坐標(biāo)，在普通坐標(biāo)紙上繪制工作曲線。

5、結(jié)果計算

式中: ω(P₂0₅)——過礴酸鈣中有效磷(P₂0₅)的質(zhì)量分數(shù)，%；

P一一測得顯色液中磷(P₂0₅)的質(zhì)量濃度,mg·L^-1；

V——顯色液定容體積，mL；

ts——分取倍數(shù).

m——試樣質(zhì)量，g。

10⁶——將mg換算成g及mL換算成L的除數(shù)。

6、允許偏差

允許相對偏差＜3%。

7、注事事項

(1)對于浸出液有顏色或含有非正磷酸鹽并可與釩鉬酸形成有色絡(luò)合物的肥料不宜用此法。

(2)試樣與浸提劑的比例、浸提時間和溫度等對有效磷的浸出量有很大影響，應(yīng)按規(guī)定條件浸提。

(3)當(dāng)試樣含磷(P₂0₅)量低時，可多取濾液體積，但不能超過5mL，因為檸檬酸濃度過大(＞2000mg·L^-1)，對磷的顯色有抑制影響。

(4)此處所用釩鉬酸銨溶液是硝酸系統(tǒng)的。如在HC1、H₂SO₄介質(zhì)中，則釩鉬酸銨溶液應(yīng)改用HC1, H₂SO₄系統(tǒng)配制，也能獲得滿意結(jié)果，比色液的酸度應(yīng)為0.5 mol·L^-1 ～1.0 mol·L^-1。若酸度太高，顯色住而不完全，甚至不顯色;低于0. 2 mol·L^-1則易產(chǎn)生沉淀物，對比色有干擾。

(5)當(dāng)室溫低于15℃時顯色較溫，需要30min以上才能顯色完全，穩(wěn)定時間可達24h。

參考資料：土壤農(nóng)業(yè)化學(xué)分析方法