測(cè)定值代入SCFAs標(biāo)準(zhǔn)曲線方程進(jìn)行含量計(jì)算。結(jié)果顯示，灌胃黑木耳胞外多糖后小鼠糞便中丙酸和丁酸含量顯著升高，其中丙酸含量為對(duì)照組的3.3倍（P＜0.01），丁酸是對(duì)照組的1.4倍（P＜0.05）（圖4）。
 

2.6黑木耳胞外多糖對(duì)小鼠腸道GPR43表達(dá)的影響

GPR43是一種特異性短鏈脂肪酸受體，它可以通過(guò)介導(dǎo)短鏈脂肪酸，在調(diào)控脂類代謝和免疫反應(yīng)等生物學(xué)過(guò)程以及在動(dòng)物腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收中發(fā)揮重要作用。本試驗(yàn)對(duì)小鼠結(jié)腸石蠟切片進(jìn)行GPR43免疫熒光檢測(cè)，結(jié)果顯示胞外多糖組小鼠結(jié)腸GPR43的表達(dá)明顯高于對(duì)照組。

2.7黑木耳胞外多糖對(duì)小鼠血清細(xì)胞因子含量的影響

細(xì)胞免疫因子參與了炎癥的發(fā)生、維持和消退，在機(jī)體免疫中起到重要作用。為了探索黑木耳胞外多糖對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的影響，利用ELISA試驗(yàn)分析了小鼠血清中的相關(guān)細(xì)胞因子水平。結(jié)果如圖6所示，胞外多糖組小鼠血清中白介素-10（IL-10）的含量顯著升高，是對(duì)照組的1.3倍（P＜0.05），而其對(duì)腫瘤壞死因子（ＴNF-α）和白介素-6（IL-6）的水平?jīng)]有明顯影響（P＞0.05）。

3討論

黑木耳中的多種生物活性成分對(duì)人體健康具有重要調(diào)節(jié)作用。本研究利用紅外光譜和高效液相定性分析了黑木耳胞外多糖的組分；通過(guò)小鼠灌胃試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)黑木耳胞外多糖可以提高小鼠腸道內(nèi)益生菌擬桿菌屬和羅氏菌屬水平，增加丙酸和丁酸含量，提升血清免疫因子IL-10水平。腸道微生物不僅參與人體能量代謝，還與眾多疾病相關(guān)，使其成為當(dāng)前研究熱點(diǎn)。隨著研究的深入，人們更能清楚地認(rèn)識(shí)到維持腸道菌群平衡對(duì)人體健康的重要性。近年，抗生素濫用逐漸引起人們的重視，其破壞腸道正常微生物組成，導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)，致使耐藥性細(xì)菌產(chǎn)生和傳播。研究發(fā)現(xiàn)，多糖具有改善機(jī)體腸道微生態(tài)的作用，具有益生元作用，是理想的微生態(tài)調(diào)節(jié)劑。本研究結(jié)果表明，黑木耳胞外多糖具有促進(jìn)小鼠腸道內(nèi)擬桿菌屬和羅氏菌屬菌群增殖的功能。擬桿菌屬能對(duì)宿主飲食、宿主腸黏膜層和其它微生物表面的復(fù)合多糖進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)和分解；羅氏菌屬能夠產(chǎn)生短鏈脂肪酸，尤其是丁酸，不僅具有影響結(jié)腸代謝、調(diào)節(jié)免疫和抗炎等作用，還可用作癥狀病理學(xué)（如膽結(jié)石形成）生物標(biāo)志物或恢復(fù)有益菌群的益生菌。因此，作為一種微生態(tài)調(diào)節(jié)劑，黑木耳胞外多糖可以在調(diào)控腸道菌群結(jié)構(gòu)方面發(fā)揮作用，具有取代抗生素治療的潛在應(yīng)用價(jià)值。

腸道微生物菌群產(chǎn)生的SCFAs作為膳食纖維的發(fā)酵產(chǎn)物，參與宿主免疫調(diào)節(jié)。在淋巴B細(xì)胞中，SCFAs增加乙酰輔酶A并調(diào)節(jié)代謝傳感器以增加氧化磷酸化、糖酵解和脂肪酸合成，從而產(chǎn)生能量和物質(zhì)促進(jìn)抗體產(chǎn)生。此外，SCFAs可以通過(guò)調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)來(lái)調(diào)控血漿中B細(xì)胞的分化。有研究表明，多糖類物質(zhì)不被消化道的胃酸和酶類消化，進(jìn)入腸道后為微生物提供營(yíng)養(yǎng)源，使其迅速增殖并產(chǎn)生大量SCFAs和一些抗菌物質(zhì)，降低腸道內(nèi)pH值，抑制腸道內(nèi)氨和吲哚等有害物質(zhì)生成，抑制有害菌生長(zhǎng)，從而改善腸道微生態(tài)。本研究發(fā)現(xiàn)黑木耳胞外多糖能提高小鼠腸道內(nèi)丙酸和丁酸含量，具有調(diào)節(jié)腸道物質(zhì)能量代謝的作用。

Kang等研究了枸杞多糖對(duì)自發(fā)性結(jié)腸炎的有益作用及其在IL-10缺失小鼠中的益生作用，發(fā)現(xiàn)枸杞多糖可以提高丁酸鹽產(chǎn)生菌羅氏菌屬的豐度。IL-10是一種抗炎細(xì)胞因子，在控制免疫反應(yīng)中起關(guān)鍵作用。在缺失IL-10的結(jié)腸炎和炎性腸病小鼠模型中，巨噬細(xì)胞中受損線粒體積累，導(dǎo)致NLRP3炎性小體激活和IL-1β產(chǎn)生，引發(fā)炎性反應(yīng)。本研究顯示，黑木耳胞外多糖能夠提升小鼠血清中免疫因子IL-10水平，具有抗炎作用。然而，黑木耳胞外多糖對(duì)IL-10的調(diào)控機(jī)制還不清楚，需要進(jìn)一步研究闡明。

綜上所述，黑木耳胞外多糖能夠促進(jìn)小鼠腸道內(nèi)有益菌增殖，提高菌群代謝產(chǎn)物SCFAs含量，增加機(jī)體抗炎因子水平，在調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡及免疫反應(yīng)方面具有重要作用。本研究為黑木耳胞外多糖益生菌微生態(tài)制劑和新型健康食品的開發(fā)提供了理論基礎(chǔ)。

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