②細胞破碎法單因素試驗

選擇寧陽圓鈴棗（干棗），將一定量的紅棗按一定的比例覆水1h，然后按照比例加水裝袋放入烘箱黑變72h，取出黑變紅棗將棗肉清洗干凈，棗皮放入80℃的烘箱內(nèi)烘干，粉碎過100目篩，放置于密閉容器中備用。按這種方法對黑變棗皮進行處理后，選取細胞破碎功率、細胞破碎時間作單因素試驗，在一定條件下提取后冷卻過濾，調(diào)pH至中性，用蒸餾水做對照，在最大吸收波長下測量類黑精提取液的吸光度值。

B細胞破碎功率對黑變紅棗棗皮類黑精提取效果的影響

在料液比為1:80，細胞破碎時間為10min的條件下，分別考察不同的細胞破碎功率下（20、30、40、50、60、70、80、90、100%）對黑變紅棗棗皮類黑精提取效果的影響。

A、細胞破碎時間對黑變紅棗棗皮類黑精提取效果的影響

在料液比為1:80，細胞破碎功率20%的條件下，分別考察不同的細胞破碎時間下（10、20、30、40、50、60min）對黑變紅棗棗皮類黑精提取效果的影響。

③聯(lián)動水浴與細胞破碎法響應(yīng)面優(yōu)化試驗

在單因素試驗基礎(chǔ)上，根據(jù)Box-Behnken試驗設(shè)計原理，以A(水浴時間)、B(水浴溫度)、C(細胞破碎時間)、D(細胞破碎功率)為自變量，以黑變紅棗棗皮類黑精吸光度γ為響應(yīng)值，設(shè)計四因素四水平的超聲波響應(yīng)面分析試驗，試驗因素和水平的取值見表2，對響應(yīng)面試驗結(jié)果所得數(shù)據(jù)采用Design-Expert8.0.6軟件進行分析和作圖。

（1）黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的研究

按黑變紅棗棗皮→提取劑提取→抽濾→醇沉→抽濾→濃縮濾液→冷凍干燥→黑變紅棗棗皮類黑精粗制品方法對黑變棗皮進行處理后，研究光照、溫度、金屬離子、pH、溶解性、食品添加劑，氧化還原劑，防腐劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

①光照對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

取一定量的pH=7的類黑精稀釋液分別置于室內(nèi)自然光、日光直射、避光處保存，分別于0、2、4、6、8、10d取樣在470nm波長處測定其吸光度值。并計算其吸光度保留率R%(R%=t時刻黑變紅棗棗皮類黑精的吸光度/初始時刻黑變紅棗棗皮類黑精的吸光度×100%）分析不同光照對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

②溫度對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

A、加熱對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

取一定量的pH=7的類黑精稀釋液，分別放置在不同溫度的水浴鍋中保溫，水浴鍋的溫度分別設(shè)置為30、40、50、60、70、80、90℃，期間每隔1h取樣，在470nm波長處測定其吸光度值。并計算出R%值，分析不同溫度對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

③溫度對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

A、加熱對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

取一定量的pH=7的類黑精稀釋液，分別放置在不同溫度的水浴鍋中保溫，水浴鍋的溫度分別設(shè)置為30、40、50、60、70、80、90℃，期間每隔1h取樣，在470nm波長處測定其吸光度值。并計算出R%值，分析不同溫度對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

B、室溫和冷藏對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

取一定量的pH=7的類黑精稀釋液，分別放置于室溫（17℃）和冷藏（0-4℃）條件下保存，期間每隔一天測一次吸光度值并計算出R%值，連測7天，分析室溫和冷藏條件下對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

④金屬離子對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

配置不同濃度K⁺、Na⁺、mg²⁺、Zn²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Ca²⁺、Al³⁺、黑變紅棗棗皮類黑精溶液，未添加金屬離子的黑變紅棗棗皮類黑精粗提液為對照，放置于室溫條件下靜置1、6、12、18、24h，并在470nm波長處測定其吸光度值。并計算出其R%值，分析不同的金屬離子對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

⑤pH對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

分別用不同濃度的HCl與NaOH溶液調(diào)節(jié)類黑精粗提液的pH的大小，觀察黑變紅棗棗皮類黑精溶液顏色變化，研究不同pH的大小對黑變紅棗棗皮類黑精的影響。

⑥黑變紅棗棗皮類黑精的溶解性

取等量的黑變紅棗棗皮類黑精粗制品，在室溫條件下分別加入蒸餾水、0.1mol/LNaOH、0.1mol/LHCl、乙醇、甲醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯，充分攪拌，靜置，觀察黑變紅棗棗皮類黑精的顏色與溶解性。

⑦食品添加劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

A、甜味劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

分別配置不同質(zhì)量分數(shù)（0%、2%、4%、6%、8%、10%）的葡萄糖和蔗糖的黑變紅棗棗皮類黑精粗提液，在室溫下分別靜置0、6、12、18、24h，并在470nm處測定其吸光度值，分析甜味劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

B、酸味劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

分別配置不同質(zhì)量分數(shù)(0%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%）的檸檬酸和抗壞血酸的黑變紅棗棗皮類黑精粗提液，在室溫下分別靜置0、6、12、18、24h，并在470nm處測定其吸光度值，分析酸味劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

⑧氧化還原劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

分別配置不同質(zhì)量分數(shù)（0%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%）的Na2S03和H2O2的黑變紅棗棗皮類黑精粗提液，在室溫內(nèi)分別靜置0、6、12、18、24h，并在470nm處測定其吸光度值，分析氧化還原劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

⑨防腐劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響

分別配置不同質(zhì)量分數(shù)（0%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%）的苯甲酸鈉和山梨酸鉀的黑變紅棗棗皮類黑精粗提液，在室溫內(nèi)分別靜置0、6、12、18、24h，并在470nm處測定其吸光度值，分析防腐劑對黑變紅棗棗皮類黑精穩(wěn)定性的影響。

二、結(jié)果與分析

1、黑變紅棗棗皮類黑精最大吸收波長的測定

類黑精的紫外可見光譜圖由圖1所示，在200～400nm處有最大吸收峰，這些主要是美拉德反應(yīng)的中間產(chǎn)物等低分子的特征吸收峰,在470nm處的吸收峰為美拉德反應(yīng)的大分子的特征吸收峰，因此測定黑變紅棗棗皮類黑精的最佳吸收波長為470nm。

2、超聲法輔助提取黑變紅棗棗皮類黑精條件研究

（1）超聲溫度對黑變紅棗棗皮類黑精提取效果的影響

超聲溫度對類黑精提取效果的影響如圖2所示，類黑精的吸光度隨著溫度的升高而逐漸增加，最后趨于平緩，隨著溫度的升高，超聲波清洗機會放出大量的熱和產(chǎn)生強大的剪切力，使得類黑精的結(jié)構(gòu)被破壞，吸光度會逐漸降低，為了避免類黑精結(jié)構(gòu)被破壞，選擇最佳的超聲溫度為60℃。
 

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